石蜡包埋的注意事项
包埋,就是将已经经过固定,脱水,透明,浸蜡的组织块从最后的蜡浴取出置入充满熔融石蜡的包埋框内,包埋成块,使组织和包埋剂相熔一体并迅速冷却,这个程序称为包埋。包埋剂凝固后,进一步加强了组织的硬度和韧度而便于进行切片。
石蜡包埋法
石蜡包埋法是制作光学显微镜切片的常规方法,它有许多优点,操作简易便于掌握,可进行连续切片,包埋后的组织可以长期保存。
包埋的方法有自动包埋机包埋和手工包埋两种。手工包埋的步骤如下:
1、组织浸入石蜡后,包埋前将组织移入包埋用石蜡杯内。从恒温箱取出置于三角架上,其下点燃酒精灯,以保持石蜡的溶解状态。
2、准备好包埋框,将包埋用的镊子在酒精灯上加温(防止镊子粘蜡)后,左手持蜡杯,右手把加温的镊子放在蜡口(直立状)倒蜡时让石蜡沿镊子注入包埋框内。
3、迅速镊取组织块放入包埋框石蜡内,切面朝下放正置入框底并轻轻压平,以保证不再有气泡。
4、待石蜡表面凝固前将标签贴于其上,需注意勿使标签与标本混淆,当蜡块冷至蜡面有一层透明蜡膜时,浸入冷水中迅速使其冷却,否则蜡内常形成结晶。
5、蜡块完全硬固后除去铜框,以保证蜡彻底凝固,立即修切,准备制成切片或储藏备用。
1、作为包埋组织使用的石蜡不仅由于气候的不同需要加以选择,而且与组织的硬度也有密切关系,过硬的组织最好用硬度较高的石蜡包埋,反之,软组织则应以硬度较低的石蜡包埋。其熔点一般要求再60度左右。
2、包埋用石蜡加温不可过高,以保持其不凝固为度,温度过高容易将组织烫坏,使得组织变硬,变脆,并发生卷曲,收缩变形而不利于切片,甚至影响诊断。另外注意埋蜡的温度和组织本身的温度,两者是否合适,温度不一致常可造成组织与周围石蜡脱裂的现象,而达不到包埋的作用。
3、包埋用石蜡应掌握用量,以组织全部包埋完毕,石蜡也恰好用完为宜。
4、包埋应注意组织病变面放在下面,并尽可能使组织放平,在不损伤组织的情况下可用镊子轻压。
5、囊壁和消化道等组织包埋时更应注意组织方位,应将组织块直立拉平,不要卷曲。
6、相同组织如包埋于一个蜡块时,除包平外,还要注意方向的一致,以利切片。
7、多块组织和碎组织包埋于一个蜡块内时,组织的排列一定要密挤靠拢,以求成直线或方块行,这样有利于切片。
8、石蜡包埋后,不宜冷凝过慢,特别是室温较高时,石蜡凝固后应立即投入冷水中加速冷却可增加石蜡密度,韧性和硬度。但冷凝过速也会因为内外温差过大造成蜡块裂损。